一个RNAi载体上反向重复片段的测序策略

相邻的反向重复DNA片段有形成单链内二级结构的倾向,属于一种测序困难的DNA模板。解决RNAi载体插入的反向重复片段的测序问题,为该类载体正确性的测序验证奠定基础。采用常规分子克隆方法构建表达小麦TaATG2串联反向重复片段的RNAi载体,设计2种策略对经菌落PCR初步鉴定的载体进行测序验证:一种是以完整的载体质粒为模板进行测序;另一种是先对载体进行酶切处理,切除反向重复片段中的一个后对保留另一个片段的线性载体进行测序。结果表明,第一种测序策略受到串联反向重复片段形成的单链内部二级结构的影响,测序信号在反向重复片段处出现衰减或乱峰,无法读取序列。第二种测序策略排除了2个反向重复片段之间的干扰,保留在载体上的片段测序信号清晰,序列准确。采用酶切切除一个片段后进行测序的方法,经过2次酶切和2次测序可以有效地对载体上的2个反向重复片段分别进行序列测定,进而确认构建载体的正确性。     

建立以TK基因为标记将外源基因导入臭曲霉（Asper—gillus...

A new system for selection of transformed Aspergillus foetidus was reported. In this system, TK- A. foetidus which were constructed by homologous recombination of mutated TK gene of vaccinia virus with TK gene of A. foetidus were screened by adding BUdR in agar plates. Conditions for screen of TK+ A. foetidus strain, transformation of A. foetidus and selection of transformed TK- A. foetidus have been studied. By using this system, several transformed A. foetidus which contained HBsAg gene derived bf a promoter H8 cloned from genomic DNA of A. foetidus were isolated. It was demonstrated that HBsAg gene was integrated into the chromosome DNA of A. foetidus by Southern blot after many passages of spores. ELISA showed that HBsAg was positive in the growth medium (p/n = 20). The 22 nm particles which were very similar to the HBsAg particles in human serum were found in the growth medium by immunoelectromicroscope. Western blot also gave the specific bands. All these data showed that HBsAg gene was expressed in A. foetidus and the products were secreted into the growth medium. The selection system using TK gene as marker could generally be used to study the expression of foreign gene in A. foetidus.     

神经营养因子基因转移载体研究进展

基因治疗可能是预防神经元变性的最有用的方法。腺病毒载体、腺相关病毒载体及逆转录病毒载体等，作为将神经营养因子基因转移珐以非神经元细胞为靶细胞的主要方法，具有潜在的区域特异性、持续性、而受性的特点，并能稳定表达神经营养因子蛋白，右逆转衰老等多种因素导致的胆碱能神经元变性，引起功能的恢复。     

珐琅质如何拯救牙齿

没有光和氧，微生物也能生存150万年之久，这发生在南极数百英尺厚的冰下，科学家通过分析泰勒冰川偶尔流出的红色水样（富含铁）发现了它们的存在。基因检测则显示这些微生物类似于今天海洋环境中的微生物。科学家认为，该微生物曾经生活在海洋，约150万年～200万年前海洋被冰川截断形成池塘，并最终被冰河覆盖，微生物也与世隔绝。至于它们为何能在没有光和氧的条件下存活数百年之久，很有可能它们能通过一种偶联的铁～硫代谢将水中的硫酸盐还原，并获得能量。     

PNAS：微生物基因测序可提高生物燃料产出效率

据物理学家组织网5月15日（北京时间）报道，美国联合生物能源研究所（JBEI）通过新的实验方法和基因测序分析，发现了细菌耐受有毒盐溶液的生理机制。有望大大提高微生物抵抗生物燃料生产过程中所使用的盐溶液毒性的能力。相关论文发表在5月14日的美国《国家科学院院刊》网站上。     

F10蛋白及mRNA在部分正常组织及癌组织中的表达

目的:了解F10基因在部分正常组织及肿瘤组织中的表达情况。方法:利用原位杂交和免疫组化方法对F10在部分正常组织和肿瘤组织中的mRNA和蛋白表达情况进行分析。结果:F10基因不仅在腺癌组织中表达呈阳性,在鳞癌组织中表现出较腺癌更强的强阳性,并且在正常组织中也有一定的表达。结论:F10是一个在多种组织普遍表达的细胞内蛋白,其功能可能与物质转运相关。     

生物技术药物：人类健康的未来保障

生物技术药物，顾名思义，是指通过生物技术（涉及DNA重组技术）所生产的用于治疗疾病的药物。从最早的疫苗、重组蛋白药物（如生长素、促红细胞生成素、白介素等）到近年来的单克隆抗体、干扰性核酸（siRNA）、纳米抗体（nanobodies）、基因治疗、干细胞（stemcells）等。这些药物的陆续问世，已经或正在为人类健康、防病治病、社会经济发展等发挥举足轻重的作用。而靶向药物的出现，更是生物技术药物领域的一朵奇葩，以其独特的疗效、极高的安全性、良好的耐受性，在重大疾病药物市场上脱颖而出，获得了包括患者及医生在内的广泛而高度的认可。